安徽养殖中华绒螯蟹体内砷形态的分布特征及膳(2)

1.2.1 测定总砷样本前处理 用电子天平称取处理好的蟹样本0.5 g (精确至0.01 g)，放入消解罐中，依次加入5 mL HNO3、2 mL H2O2、1 mL 超纯水，将消解罐放置微波消解仪，打开电源，设置消解程序，具体参数见表1。消解完毕后令其自然冷却至室温，并用超纯水准确定容至50 mL，摇匀过滤，等待上机检测。

表1 微波消解程序参数Table 1 Parameters of microwave digestion procedure程序Procedure功率Power/W 1快速升温 室温～140 5 600 2缓慢升温 140～190 8 800 3保持 190 15 1 000 4降温 190～室温 10 400过程Process温度Temperature/℃反应时间Reaction time/min

1.2.2 测定砷形态样本前处理 用电子天平称取处理好的蟹样本1.0 g (精确至0.01 g) 于50 mL离心管中，加入0.25 mmol·L-1磷酸二氢铵(NH4H2PO4) 溶液20 mL提取样本中的砷形态，将离心管放置涡旋仪，以2 500 r·min-1转速涡旋5 min，超声波仪超声30 min，超声结束后放置高速冷冻离心机内，以10 000 r·min-1转速离心15 min，完毕用移液枪吸取上清液10 mL至另一个50 mL离心管，加入10 mL正己烷脱脂，并继续上述涡旋、离心步骤，第二次离心结束后取出，用一次性针管吸取1 mL下清液经0.22 μm有机滤膜过滤至自动进样螺旋瓶中，待上机检测。

1.3 仪器分析条件

Agilent 7800 ICP-MS用以测定中华绒螯蟹样本总砷质量分数；Agilent 8900 HPLC-ICP-MS用以测定蟹样本6种砷形态质量分数，色谱柱：阴离子交换柱Dionex IonPacTMAS19 (4×250 mm)，流动相 A 为 25 mmol·L-1NH4H2PO4(pH=8.0) 溶液；流动相B为超纯水，流速1.0 mL·min-1，流动相上机之前需超声40 min；读数方式峰面积；6种砷形态检测限范围为0.006～0.091 mg·kg-1，6种砷形态平均加标回收率为70%～120%；本实验总砷测定值均高于其检测限。ICP-MS仪器参数[24]和HPLC-ICPMS质谱条件见表2。

1.4 膳食风险评估

每日预估摄入量 (Estimated daily intake, EDI)和靶标危害系数 (Target hazard quotient, THQ) 常被用于评价重金属对人体健康产生的风险水平，公式为：

公式 (1)根据中国环境保护部2013年的数据[25]，本研究中EDI表示成年人每天摄入中华绒螯蟹体内无机砷的估计量[mg·(kg·d)-1]，Efr为重金属暴露频率 (365 d·a-1)，EDtot为持续暴露时间 (70 a，接近人平均寿命)，FIR为鱼虾类日消耗量(29.6 g·d-1)，CiAs为蟹体的无机砷iAs质量分数(mg·kg-1，湿质量)，Bw为成人平均体质量 (60.3 kg)，Atn为平均暴露时间 (d)；公式 (2)：RfD表示重金属的参考剂量，无机砷的 Rf D 值为 3×10-4mg·(kg·d)-1[26]，THQ＜1时表示无明显的健康风险。

表2 电感耦合等离子体质谱法及高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法程序参数Table 2 Parameters of ICP-MS and HPLC-ICP-MS高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法HPLC-ICP-MS雾化室 Atomizing chamber/℃ 2 2采样深度 Sampling depth/mm 7.5 8.0 IF/BK 真空度 IF/BK vacuum degree/kPa 238 180反馈功率 Feedback power/W ＜3 ＜10雾化器压力 Atomizer pressure/kPa 320 364等离子体 (氩气) 流量 Plasma gas (argon) flow/(L·min-1) 15.00 15.00辅助气流量 Auxiliary gas flow/(L·min-1) 1.00 1.00雾化器流量 Atomized gas/(L·min-1) 1.00 1.00补偿/稀释气流量 Compensate/dilute gas flow/(L·min-1) 1.00 1.00参数Parameter电感耦合等离子体质谱法ICP-MS

1.5 数据分析

数据统计及相关图表采用Excel 2003软件完成；数据差异性分析使用SPSS 19.0软件，数据结果以“平均值±标准差 (±SD)”表示。

2 结果

2.1 中华绒螯蟹样品中总砷及砷形态质量分数的测定

应用ICP-MS测得的总砷和HPLC-ICP-MS测得的6种砷形态化合物质量分数见表3。27份中华绒螯蟹样本中，总砷全部检出，检出率为100%；依据各自不同砷形态检测限，AsB、AsC、MMA、DMA、AsⅢ、AsⅤ检出率分别为100%、96%、85%、93%、100%、41%。27份螃蟹样本中总砷和6种砷形态之和质量分数范围见图1，分别为0.073～1.433 mg·kg-1和 0.039～0.543 mg·kg-1。养殖区域的中华绒螯蟹中总砷及砷形态质量分数存在一定差异，但DMA、MMA、AsⅢ和AsⅤ的质量分数差异不显著，此外AsB和AsC的质量分数无统计学意义。就平均质量分数而言，蟹样本总砷质量分数由大到小依次为：宣城＞当涂＞滁州＞安庆＞蚌埠＞芜湖＞巢湖＞无为，宣城地区总砷质量分数最高 [(0.) mg·kg-1]，最小质量分数 [(0.) mg·kg-1]出现在无为。蟹样本6种砷形态之和质量分数由大到小依次为：当涂＞宣城＞芜湖＞巢湖＞蚌埠＞无为＞滁州＞安庆，质量分数最高[(0.) mg·kg-1]和最低 [(0.)mg·kg-1]分别出现在当涂和安庆两地。总而言之，当涂和宣城是砷元素质量分数较高的中华绒螯蟹养殖基地。

文章来源：《安徽农学通报》 网址: http://www.ahnxtbzz.cn/qikandaodu/2021/0210/484.html